曼弗雷德暴跳如雷，想起自己向伊莎贝拉表达感情时，她毫不留情地让他走开。她如此不安，肯定是急着要去见西奥多。这种推测让他感到气愤，再加上刚才她父亲又惹恼了他，因此，他悄悄地朝大教堂跑去。公爵蹑手蹑脚地穿过走廊，借着窗户里透进的微弱月光，听到阿方索墓那边传来断断续续的低语声，就悄悄朝那边走去。他听清的第一句话是：
"难道，哎呀！取决于我吗？曼弗雷德永远不会同意我们结婚的。"
"对，这样就可以阻止了！"这个暴君叫着，拔出短剑，从说话人的肩膀上方朝她的胸膛刺去。
"啊，我被杀死了！"玛蒂尔达叫着倒了下去，"上帝啊，接受我的灵魂吧！"
"畜生，野兽，你要干什么？"西奥多叫着冲了上去，一把夺下了他手里的短剑。
"住手，松开你不敬的手！"玛蒂尔达叫道，"那是我的父亲！"
曼弗雷德仿佛刚从噩梦中醒来，一会儿捶着自己的胸脯，一会儿扯着自己的头发，然后用尽力气想从西奥多手里夺回那柄短剑，来结束自己的生命。西奥多不知所措，只是满怀悲痛地照顾着玛蒂尔达。听到他的呼救声，一些修道士跑出来帮忙。他们有的帮着伤心的西奥多一起为奄奄一息的小姐止血，有的则努力制止曼弗雷德伤害他自己。
玛蒂尔达坦然接受了自己的命运，用充满爱意的目光注视着西奥多，感谢他的一份深情。她竟然恳求正在救他的人去安慰她的父亲。
这时，杰罗姆听到了这个致命的消息，也来到了教堂。他的脸色似乎在责备西奥多，可又转向了曼弗雷德，他说："现在，暴君，看到报应在你身上实现了吧！阿方索的血脉向上帝呼唤复仇，上帝已经准许暗杀来玷污它的圣坛，你可以让自己的鲜血流在这位公爵的墓前！"
"你这残酷的人，"玛蒂尔达叫道，"竟加重一位父亲的悲哀！愿上帝保佑我的父亲，像我一样原谅他！老爷，我慈祥的父亲，您能原谅您的孩子吗？我来这里真的不是为了见西奥多。我母亲让我来墓前为您祈祷，也为她祈祷，我来到这儿，发现西奥多也在墓前祈祷--最亲爱的父亲，保佑您的孩子吧，说您原谅她吧。"
"原谅你，我这丑恶的杀人犯，"曼弗雷德叫道，"可是杀人犯能被原谅吗？我把你当成了伊莎贝拉，可是上帝却让我血淋淋的手刺向了我自己的孩子--噢，玛蒂尔达，我说不下去了，你能原谅我盲目的愤怒吗？"
"我能，我会的，上帝可以作证，"玛蒂尔达说，"如果我还能活着请求他的话--噢，我的母亲，她会怎么想！您能安慰她吗，老爷，您能不能不赶她走？她真的深爱着您--噢，我快不行了，把我抬到城堡去--没见到她，我又怎么能合眼呢？"
西奥多和修士们请她忍着些，想把她赶紧送到修道院去，可她苦苦哀求人们把她送到城堡去，大家被她打动了，就把她放到担架上，按照她的请求把她送回城堡。西奥多用自己的胳膊托着她的头，绝望地俯身看着她，竭力鼓励她要相信自己能活下去。杰罗姆在她的另一侧，用天堂的话语安慰她，把一个十字架举在她的面前，为她能够获得永生作准备，十字架上面洒满了她纯洁的泪水。曼弗雷德怀着深深的痛苦，绝望地跟在担架后面。
他们还没有到达城堡，希珀丽塔就已经知道了这可怕的灾难，跑出来见她那被杀的孩子，可是一见到那悲伤的队伍，巨大的悲痛就让她失去了知觉，昏倒在地上。伊莎贝拉和弗雷德里克正陪着希珀丽塔，此时几乎被同样的悲痛击倒了。玛蒂尔达本人对自己的处境似乎并不在意，心里只有对母亲的爱。她让担架停了下来，希珀丽塔一恢复知觉，玛蒂尔达就询问她的父亲在哪里。他来到她面前，泣不成声。玛蒂尔达抓起了父亲和母亲的手，用自己的双手捧着放在了自己的胸口。看到玛蒂尔达这样孝顺，做出了如此让人心碎的动作，曼弗雷德再也忍不住了，他猛地扑倒在地，诅咒自己为什么会来到这个世界。伊莎贝拉知道玛蒂尔达无法承受这种场面，就让人把曼弗雷德送回他自己的房间，同时让人把玛蒂尔达送到最近的房间里去。希珀丽塔也和她的女儿一样奄奄一息，心里只想着玛蒂尔达。温柔的伊莎贝拉请她离开一下，好让医生检查玛蒂尔达的伤势，她却叫了起来：
"让我离开？决不！决不！决不！我只为她活着，我要和她一起死。"玛蒂尔达听到母亲的声音，睁开了眼睛，又闭上了，没有说话。她越来越弱的脉搏和冰冷的手很快就让人们放弃了救活她的希望。西奥多跟着几个医生到了外间，听到他们说已经毫无救活的希望时，顿时怒不可遏。
"既然她活着，不能属于我，"他喊叫着，"至少死了，应该属于我！父亲！杰罗姆！难道你不能让我们结合吗？"他冲着修士喊道，此时的杰罗姆正和侯爵陪着那些医生。
"你这么狂躁，想干什么？"杰罗姆说，"这是结婚的时间吗？"
"是的，是的，"西奥多喊叫着，"哎呀！我不会再同别人结婚了！"
"年轻人，你太鲁莽了，"弗雷德里克说，"你以为在这个关键时刻，我们会听你表白爱情吗？你有什么资格这样做？"
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